PCR實(shí)驗(experiment)室依據所使用的方法可分為試劑準備、標本制備、擴增、產(chǎn)物分析(Analyse)等三或四個(gè)區域。潔凈實(shí)驗室主要用于微生物學(xué)、生物醫學(xué)、生物化學(xué)、動(dòng)物實(shí)驗、基因重組以及生物制品等研究使用的實(shí)驗室統稱(chēng)潔凈實(shí)驗室-生物安全實(shí)驗室。無(wú)菌試驗室、生物安全實(shí)驗室由主實(shí)功能驗室與其他實(shí)驗室及輔助功能用房組成。只是使用實(shí)時(shí)熒光PCR儀、HIV病毒載量測定儀的PCR實(shí)驗室,有上述前面三個(gè)區域即可。各區域應完全獨立分隔,不應有任何的空氣直通。
PCR實(shí)驗(experiment)室對污染的預防與控制(control):
PCR實(shí)驗(experiment)室設計的核心(core)問(wèn)題是如何避免污染。凈化實(shí)驗室必須控制實(shí)驗室的潔凈度,對新風(fēng)進(jìn)行過(guò)濾,使實(shí)驗室達到一定的凈化要求。其中排風(fēng)系統是重點(diǎn),對于保證實(shí)驗室相對負壓環(huán)境和有效過(guò)濾室內污染排風(fēng)起著(zhù)重要的作用。凈化實(shí)驗室控制系統是整個(gè)潔凈實(shí)驗室安全運行的神經(jīng)中樞,由于潔凈實(shí)驗室-生物安全實(shí)驗室的實(shí)驗對象是危險性的微生物,出于嚴格控制污染的原則,它要求以最少的維護人員,運用最優(yōu)化的管理維護手段,來(lái)實(shí)時(shí)監控每一個(gè)實(shí)驗室中設備所處的物理環(huán)境,保證實(shí)驗室運行過(guò)程中始終處于相對負壓環(huán)境,防止危險性微生物外泄。在實(shí)際工作中,常見(jiàn)的有以下幾種污染類(lèi)型:擴增產(chǎn)物的污染;天然基因組DNA的污染;試劑的污染以及標本間的污染。由于一旦發(fā)生污染,實(shí)驗就必須停止,直到找到污染源為止,而且實(shí)驗結果必須作廢,需重新進(jìn)行實(shí)驗。所以發(fā)生污染后再?lài)@(circumfuse)實(shí)驗室來(lái)尋找污染源不但耗時(shí)而且繁瑣(fán suǒ),浪費人力物力。因此要避免污染,首先應是預防,而不是排除(Remove)。
PCR實(shí)驗(experiment)室功能區分為:
一、普通實(shí)驗(experiment)區——法醫物證常規檢驗室、法醫物證存儲室、受案室、檢材室、骨骼(skeleton)提取實(shí)驗(experiment)室、數據(data)比對分析(Analyse)室、緊急淋浴洗眼間、潔具間、洗衣間、測序儀專(zhuān)用UPHOTOSHOP機房;
二、特殊實(shí)驗(experiment)區 / 污染控制(control)區——更鞋 / 緩沖走廊、更衣 / 緩沖間、現場(chǎng)物證DNA提取間(30-50㎡)、嫌犯血樣DNA提取間(15-30㎡)、試劑混配間(15-30㎡)、PCR擴增間(15-30㎡)、擴增產(chǎn)物測序間(15-30㎡);