實(shí)驗(experiment)室空調通風(fēng)系統設計及壓力控制(control)
PCR實(shí)驗(experiment)室并沒(méi)有嚴格的凈化要求,但是為避免各個(gè)實(shí)驗區域間交叉污染的可能(maybe)性,宜采用全送全排的氣流組織形式。實(shí)驗室凈化由于潔凈實(shí)驗室-生物安全實(shí)驗室內操作對象是危險性的微生物,對人體、動(dòng)植物或環(huán)境具有危害,必須通過(guò)采用合理的空氣調節系統,保持潔凈實(shí)驗室-生物安全實(shí)驗室的相對負壓環(huán)境無(wú)論何時(shí)都不被破壞,以保證實(shí)驗室內危險性微生物不能向外部環(huán)境中擴散。同時(shí),要嚴格控制(control)送、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗區的壓力要求。 2.1試劑貯存和準備區
該實(shí)驗(experiment)區主要進(jìn)行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應混合液的制備。試劑和用于樣品制作的材料應直接運送至該區,不得經(jīng)過(guò)其他區域。試劑原料(raw material)必須貯存在本區內,并在本區內制備成所需的貯存試劑。 對與氣流壓力的控制(control),本區并沒(méi)有嚴格的要求。
標本制備區
該區域主要進(jìn)行的操作為樣本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增產(chǎn)物 分析(Analyse)區
試劑貯存和準備區
標本制備區
擴增反應混合物配制和擴增區
緩 沖 區
傳遞(transmission)窗
本區的壓力梯度要求為:相對于鄰近區域為正壓,以避免從鄰近區進(jìn)入本區的氣溶膠污染。凈化實(shí)驗室控制系統是整個(gè)潔凈實(shí)驗室安全運行的神經(jīng)中樞,由于潔凈實(shí)驗室-生物安全實(shí)驗室的實(shí)驗對象是危險性的微生物,出于嚴格控制污染的原則,它要求以最少的維護人員,運用最優(yōu)化的管理維護手段,來(lái)實(shí)時(shí)監控每一個(gè)實(shí)驗室中設備所處的物理環(huán)境,保證實(shí)驗室運行過(guò)程中始終處于相對負壓環(huán)境,防止危險性微生物外泄。另外,由于在加樣操作中可能(maybe)會(huì )發(fā)生氣溶膠所致的污染,所以應避免在本區內不必要的走動(dòng)。
擴增反應混合物配制和擴增區
該區域主要進(jìn)行的操作為DNA擴增。此外,已制備的DNA模板 (來(lái)自樣本制備區)的加入和主反應混合液(來(lái)自試劑貯存和制備區)制備成反應混合液等也可在本區內進(jìn)行。
本區的壓力梯度要求為:相對于鄰近區域為負壓,以避免氣溶膠從本區漏出。為避免氣溶膠所致的污染,應盡量減少在本區內的不必要的走動(dòng)。個(gè)別操作如加樣等應在超凈臺內進(jìn)行。
擴增產(chǎn)物分析(Analyse)區
該區域主要進(jìn)行的操作為擴增片段的測定。凈化實(shí)驗室必須控制實(shí)驗室的潔凈度,對新風(fēng)進(jìn)行過(guò)濾,使實(shí)驗室達到一定的凈化要求。其中排風(fēng)系統是重點(diǎn),對于保證實(shí)驗室相對負壓環(huán)境和有效過(guò)濾室內污染排風(fēng)起著(zhù)重要的作用。
本區是最主要的擴增產(chǎn)物污染來(lái)源,因此對本區的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區域為負壓,以避免擴增產(chǎn)物從本區擴散至其它區域。